中药标准化回顾

中药是中国医药学的瑰宝，对中华民族的繁衍昌盛做出了伟大的贡献。为了保证中药的安全性和有效性，数千年来中医药一直处于不断标准化、规范化的进程中，《神农本草经》则是最早的中药标准。李时珍的《本草纲目》是中药学标准规范的深化。历史发展到今天，总结前人经验，补充完善、制定中药系列标准是中药现代化的需要，也是中药国际化，造福全人类的需要。
 



1国家药品标准的进展



1.1药典标准

中国药典是国家为保证药品质量所制订的法典，是药品生产、经营、使用、检验和监督管理部门共同遵循的法定依据，也是我国医药行业对外贸易和技术交流不可缺少的准绳。早在1930年即有《中华药典》的问世，收载生药六、七十种。1949年以后，通过多年来大量的科学实验工作，认真总结传统鉴别经验，吸取近代科研成果，应用新的检测技术手段，从无到有，自1953年到1995年编印发布了6版药典，跨世纪2000年版药典也即将出版，历版药典收载品种情况见表1。

表1

年版
中药材
中药成方制剂
合计

1953
65
46（单方制剂）
111

1963
446
197
643

1977
882
270
1152

1985
506
207
713

1990
509
275
784

1995
522
398
920

2000
534
458
9921


1953年版药典收载品种计有大黄等几十种国际通用生药，内容大部分参考国外药典制定；制剂均为单方，如浸膏、流浸膏、酊剂、软膏等。自1963年版以后，为了突出中药标准的地位，将药典分为一、二两部，一部根据传统的中医药理论和经验收载的均为中药，收载品种以6倍量骤增并增加了鉴别项，为体现中药特色，增收了炮制、性味、功能、主治、用法与用量等项内容。1977年版药典正值大搞中草药群众运动，收载了相当数量的民间草药，并包括少数民族用药，显微鉴别项大量增加。1985年版药典正逢“药品管理法”颁布执行，从而真正成为判定药品真、伪、优、劣的法定标准。其余各版药典收载品种及项目循序渐进，在实践中不断优选增收，2000年版收载已近千种，而且均为经过医学与药学审查常用的安全有效药物，标准中建立量化指标的项目占39%，方法分析见表2。

表2                2000年版药典品种量化指标方法分析

含测方法
挥发油测定
经典法（容量法、重量法）
分光光度法
液相色谱法
气相色谱法
薄层扫描法
其他
浸出物
合计

项目
32
 59
 48
 105
 11
 60
 10
 63
 388


为了使我国药品标准与国际交流，1985年版和1990年版药典编译了英文版，1995年版药典也已编译完成。

在此期间中国台北于1959年和1980年分别出版了中华药典第二、第三版，但生药品种只保留了10余种。



1.2部颁标准



1.2.1中成药部颁标准  《药品管理法》实施以来，针对中成药品种中存在处方不合理，疗效不确切等问题，国家为了加强中成药管理，促进中成药生产，提高质量，以保证人民用药安全有效，于1986年全国各省、自治区、直辖市卫生厅（局），对当地的中药成方制剂进行全面调查，初步统计共约8000种，其中近2000种为同名异方，同方异名品种。经医学和药学审查，对其中符合部颁标准条件的品种，整理汇编为《中华人民共和国卫生部药品标准》“中药成方制剂”分20册，共4052种，其中1—19册收载3736种已颁布施行。在汇编过程中，做了大量试验研究，许多品种在原地方标准基础上增订显微鉴别，薄层鉴别及含量测定等项目，使其标准更加完善、可控。在3736个品种中，标准中建立量化指标项目的占11%，方法分析见表3。

表3     部颁品种量化指标方法分析

含测方法
挥发油测定
经典法（容量法、重量法）
分光光度法
液相色谱法
气相色谱法
薄层扫描法
其他
浸出物
合计

项目
18
98
 125
 42
 18
 30
 29
 56
416




1.2.2中药材部颁标准   中药品种繁多，来源于植物、动物及矿物，但由于基源相近，外形相似等原因，出现了众多的“同名异物”和“同物异名”的现象，为澄清中药材品种混乱，卫生部责成中国药品生物制品检定所牵头，组织各省、自治区、直辖市药品检验所，对全国药材二级站所经销的中药材品种进行全面调查、鉴定。除《中国药典》收载的品种外，其余的品种，凡来源清楚，疗效确切，较多地区经营使用的中药材，本着“一名一物”原则，分期分批，制订部标准，第一批收载了101种，汇编为《中华人民共和国卫生部药品标准》中药材（第一册），于1991年12月10日颁布执行。此外，各省、自治区、直辖市经营、使用的中药材，除《中国药典》与部颁标准已收载者外，其余制订为地方标准。



1.2.3进口药材部标准    进口药材是中医防病治病不可缺少的一部分。，我国应用的进口药材约50种，1960年制订了质量标准初稿。为确保进口药材的质量，卫生部授权各口岸药品检验所，负责对进口药材进行检验。经20余年来进口检验，积累了大量的数据和资料，为制订进口药材质量标准提供了科学依据。其中44种经卫生部审定批准，汇编为《进口药材暂行标准》，于1975年发布试行，作为进口药材检验的法定标准。接着又不断研究，改进检测方法，选择其中较成熟的32个品种，对其质量标准作进一步修订完善，作为《中华人民共和国卫生部进口药材标准》，于1986年发布施行。



1.3新药标准

1985年7月1日卫生部发布施行的《新药审批办法》，其附件四“新药（中药）申报资料项目”中明确规定：申报临床及申报生产应分别提供临床研究用及生产用药品质量标准草案及起草说明。针对中药特点及我国现阶段的实际情况，卫生部于1992年9月1日又发布了“《新药审批办法》有关中药部分的修订和补充规定”，在其附件七中规定了“质量标准研究的技术要求”。1993年4月卫生部针对中药注射剂的研制，发布了《中药注射剂研制指导原则》（试行），提出了注射剂质量标准的内容及项目要求。1994年卫生部药政局下发《中药新药研究指南（药学、药理学、毒理学）》。1999年5月1日国家药品监督管理局重新发布了《新药审批办法》，随即发布了《中药新药研究的技术要求》，包括有关质量标准的研究内容，对研究新药质量标准应“做什么”和“如何做”均有明确要求和说明。不仅使新药质量标准制订走向规范化、科学化、标准化，而且对老药的再评价也有章可循。新药经批准后，其质量标准为试行标准，批准为试生产的新药，其标准试行期为3年，其他新药的标准试行期为2年，试行期满后，由国家药典委员会正式转为部颁标准（今后为国家药品监督管理局颁布标准），目前多数品种正在申报过程中或标准试行期。凡转正的品种已汇编为《新药转正标准》第1-15册，共计225种，标准中建立有量化指标项目的占89%。初期批准的新药标准，有些尚缺此项，后期标准则逐步完善。方法分析见表4。

表4           新药转正品种量化指标方法分析

含测方法
挥发油测定
经典法（容量法、重量法）
分光光度法
液相色谱法
气相色谱法
薄层扫描法
其他
浸出物
合计

项目
0
28
61
42
7
35
16
12
201




2《中国药典》中药部分（一部）编制的指导思想是“突出特色，立足提高”



2.1突出特色即在制定中药标准中突出中医理论的指导作用，反映中医用药与质量标准的内在关系，并增收在治疗上有特色的品种。



2.1.1中医多以复方用药，处方是根据病人体质及病情在辨证论治基础上按一定的组方原则，选择适当的药物依君、臣、佐、使配伍而成。由于成分复杂，不可能逐一测定，按组方原则选其君药、臣药，即针对起主要或协助主药加强治疗作用的药味建立含量测定项，如具泻火舒肝的“左金丸”，滋阴补肾的“六味地黄丸”，前者选测黄连中小檗碱；后者选测山茱萸中熊果酸、牡丹皮中丹皮酚。这绝不意味着中医用药主要用小檗碱代黄连，熊果酸代山茱萸，丹皮酚代牡丹皮，而是以此成分分别衡量各制剂的质量。



2.1.2在检测成分上也要注意以中医临床功能主治与现代药理学相结合进行研究，如山楂，在以消食健胃功能为主的制剂中，则应测其有机酸含量，如山楂化滞丸测定熊果酸含量；如以活血止痛治疗心血管病为主，则应测其所含黄酮类成分，因其具有降压、增强冠脉流量、强心、抗心率不齐等作用。又如何首乌，现代药理学证明，其所含二苯乙烯甙类化合物具有抗衰老、提高免疫功能、防治动脉硬化及保肝等作用，测定二苯乙烯甙类化合物，作为该类中成药质控指标。药典收载的“复方丹参滴丸”，药理研究证明其活血化瘀的主成分为水溶性成分，以丹参素为代表，故测定丹参素作为质控指标。



2.1.3中药材含有多种成分，中成药组分更为复杂。有效成分或指标性成分含量往往为千分或万分之几，甚至十万分之几，用以控制和评价药品质量不够理想。药典对某些品种规定，除检测单一专属性成分外，同时测定大类成分如总黄酮、总氮量等。如果单一成分低于万分之一，则必须选择适宜溶剂增订浸出物测定项目或测定另一味药中有效成分的含量，从而达到从微观至宏观，增加评价药品质量多参数目的。2000年版药典2种药材，7种中成药均体现了以上的制定原则，结果见表5。如选处方中欲测含量的药味，它含有两种以上的已知成分，而且用同一种检测方法可以同时测定，且方法学考察均符合分析要求，药典即规定该种药测定二种成分，也可达到增加质量覆盖面的目的，但所含二种成分多少，往往不存在固定比例的规律，为了避免判定结果出现矛盾，以视二者为共具疗效的物质，故以二者之和制定含量限度，结果见表6。以上均显示了中药质量标准研究与制定的特色。

表5              多指标测定品种与项目

序号
品名
检测成分

1
半枝莲
总黄酮、野黄芩甙

2
淫羊藿
总黄酮、淫羊藿甙

3
六味地黄丸
牡丹皮中的丹皮酚、山茱萸中熊果酸

4
六味地黄颗粒
牡丹皮中的丹皮酚、山茱萸中熊果酸

5
注射用双黄连
金银花中绿原酸、黄芩中黄芩甙

6
独一味胶囊
总黄酮、正丁醇提取物

7
桂龙咳喘宁胶囊
挥发性醚浸出物、桂枝中肉桂酸

8
清开灵口服液
黄芩中黄芩甙、总氮量

9
鼻窦炎口服液
正丁醇提取物、黄芩中黄芩甙




表6                 规定的含量限度为多成分之和

序号
品名
检测成分
测定方法
含量限度（%）

1
人参
人参皂甙Rg1和人参皂甙Re的总量
HPLC
≥0.25

2
人参叶
人参皂甙Rg1和人参皂甙Re的总量
HPLC
≥2.25

3
儿茶
儿茶素和表儿茶素的总量
HPLC
≥21.0

4
三七
人参皂甙Rb1和人参皂甙Rg1的总量
TLCS
≥3.8

5
大黄
大黄素和大黄酚的总量
HPLC
≥0.50

6
防风
升麻甙和5-O-甲基维斯阿米醇甙的总量
HPLC
≥0.24

7
红参
人参皂甙Rg1和人参皂甙Re的总量
HPLC
≥0.20

8
吴茱萸
吴茱萸碱和吴茱萸次碱的总量
HPLC
≥0.20

9
厚朴
厚朴酚与和厚朴酚的总量
HPLC
≥2.0

10
厚朴花
厚朴酚与和厚朴酚的总量
HPLC
≥0.20

11
穿心莲
穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的总量
TLCS
≥0.80

12
蟾酥
华蟾蜍次素和脂蟾毒配基的总量
HPLC
≥6.0




2.1.4另外特色还体现在炮制品单列。鉴于中药炮制是祖国医药学特色之一，对保证药品质量和临床用药都具有重要意义。从1985年版开始，制川乌、马钱子粉、巴豆霜、制何首乌、制草乌等五味单列为一个品种。1990年版在白附子、杜仲、射干炮制品项下，除增加了炮制品性状描述外，其中杜仲、射干、黄连、薄荷等四种还制定了含量限度，这是过去历版药典所没有的内容。1995年版又将炮姜、灸甘草、灸黄芩、熟地黄、法半夏、煅石膏、焦槟榔、千金子霜等8种列为单一品种，并相应建立了检测项目或含量标准，以保证其质量。如千金子含脂肪油40～50%，油中所含毒性成分为千金子甾醇，此成分对胃肠具有刺激作用，可产生峻泻，其作用强度比蓖麻子油大3倍，去油制成霜可缓和泻下作用，并降低了毒性，单列为一个品种，并规定了脂肪油含量应为18.0～20.0%，保证了用药的安全性。



2.2立足提高是指将制定中药标准的重点放在提高水平上，继续发展和扩大现代化科学技术的应用，将中医药传统经验与现代科学技术密切结合，以中医理论为指导，在中药质量标准中指标控制含量限度与疗效的关系方面有所创新和突破，使中药标准做到可控、可行、可靠。



2.2.1真伪鉴别通过研究和不断修订，中药标准有了很大提高。回顾1963年版药典收载品种少，内容简单，标准项目不全，检测手段相对落后。中药材仅以性状确定真伪；中成药只采用固定处方组成，严格炮制与制备工艺，配合感观经验检查，缺少客观指标。

专属性强的薄层色谱鉴别始载于1985年版药典，如人参以人参皂甙Rg1、Re、Rb1为对照品建成薄层鉴别，大黄中鉴别数种蒽醌甙元。1990年版和1995年版药典内容更加充实，采用薄层谱鉴别不论在数量和质量上，都比1985年版有了很大的提高，而且很多品种建立了多项薄层色谱鉴别，如万氏牛黄清心丸，由六味药组成，1985年版药典中只有显微鉴别和试管反应，1990年版药典共增加了四项薄层，分别鉴别其中牛黄、黄芩、栀子、黄连等四味药。又如栀子金花丸，由八味药组成，1985年版只有显微鉴别、试管反应和微量升华鉴别，1990年版增加三项薄层，分别鉴别其中栀子、黄芩、大黄等三味药，1995年版除上述三项薄层外又增订黄连薄层鉴别。有的一项薄层鉴别可同时鉴别多种药味，如麻仁丸，是在同一块薄层板上鉴别枳实、大黄和厚朴三种药味。

即使这样，仍存在不足，质量标准仍不够完善，内在质量评价的方法、数量和水平还存在差距。95年版药典中药材有80余种；中成药有20余种尚无任何检测项目，特别是中成药标准中，已建立鉴别或含量测定的药味，而与其相应的药材却未收载鉴别或含量测定，这种状况亟待填平补齐，建立相应的检测手段。2000年版药典已有所改变，如土贝母以往药典仅以性状确定真伪，新版药典增加土贝母甙甲薄层色谱鉴别，白果增加银杏内酯A、C的薄层鉴别，川芎茶调丸增加了白芷的薄层鉴别。再如1995年版药典收载含山楂的6种中成药，均以熊果酸薄层鉴别来确认山楂的存在，但山楂药材标准中却无熊果酸的鉴别。新版则增订山楂药材中熊果酸薄层鉴别。新增加的59种中成药绝大多数规定有薄层鉴别项，大大提高了鉴别的专属性与科学性。



2. 2. 2药品的纯度药品检查以保证其纯度，有效性和安全性，为此制订药品质量标准时，一般应规定检查项目。《中国药典》制剂通则在各剂型项下均规定有检查项目，中药材除规定杂质、水分、灰分、重金属等常规检查外，尚根据具体情况，规定特殊检查项目，如桑寄生，若寄生在夹竹桃树上即有明显的强心甙反应，具毒性，故规定作强心甙检查，以控制有毒夹竹桃寄生的混入；若寄生在马桑上，应检查有毒成分印度防己毒素，以控制马桑寄生的混入。有些毒性中药，经炮制后是否符合要求，规定有关项目检查，如检查制川乌与制草乌中的毒性生物碱-酯型生物碱方面，85年版药典收载的是薄层限量法，由于仅以乌头碱作对照品，而乌头中的其它毒性成分美沙乌头碱，海帕乌头碱等双酯型生物碱以及单酯型、三酯型生物碱均无法检出，方法欠妥，1990年版药典改用分光光度法，以测定各种酯型生物碱的酯键来反映毒性成分的含量，能够准确、全面地控制川乌、草乌炮制品的毒性。阿胶是由驴皮加工制成的，在生产过程中可能会产生一些带有腐败气味的碱性物质，影响药品质量和服用效果，应该加以控制。为此，1990年版药典新增了“挥发性碱性物质”的检查方法。



2.2.3质量优劣判定药品只有真伪鉴别，尚不足以评价和保证药品质量，必须引入量化数据，对内在质量加以控制，才能真正达到使病人服用安全有效的目的。药典除采用经典检测方法外，随着科学技术发展，引用现代新技术，控制药品质量。1990年版药典首次引用现代仪器的检测方法，如高效液相色谱法、气相色谱法和薄层扫描法等，分别应用于化橘红等5种、斑蝥等2种及山茱萸等2种的含量测定。1995年版药典已分别达11种、3种和19种。从个别品种对原有测定方法进行改进、完善，如测定黄连中的小檗碱、黄连碱、巴马亭和药根碱等生物碱，1953年版首次采用重量法，即丙酮小檗碱沉淀法测定小檗碱的含量，1963年版、1977年版仍沿用，存在操作较为繁琐，费时，条件要求苛刻等问题，1985年版改为分光光度法（吸收系数法），测其总生物碱含量以盐酸小檗碱计，1995年版改用荧光扫描法，直接测小檗碱含量。又如化橘红含多种二氢黄酮类化合物，其中主要成分柚皮甙含量高低是评价化橘红质量优劣的客观指标。1985年版采用四氢硼钾还原比色法，在显色过程中，其它二氢黄酮也同时显色，结果只能测定总二氢黄酮，以柚皮甙计算含量，不能真实地反映柚皮甙的含量，1990年版改用高效液相色谱法，能单独测柚皮甙，提高了专属性。再如蟾酥主要含脂蟾毒配基，华蟾蜍次素，蟾毒灵等强心甾体化合物，1985年版始载用氯仿提取后测定重量的方法，1995年版改用分光光度法（吸收系数法），2000年版改用高效液相色谱法。马钱子含测方法也有提高，1977年版以前为容量法，1985年版改为分光光度法，均系参考国外药典而来，2000年版改为高效液相色谱法，其专属性、准确性、科学性均有明显提高，充分体现标准进展性。2000年版药典含量测定方法较1995年版药典增加157种，其中增加较多的是高效液相色谱法（94个），占新增含量测定品种数的58%，而1995年版药典收载高效液相色谱法的品种仅为11个，2000年版药典收载高效液相色谱法的数量较1995年版药典收载数量增加了近9倍，显示了中药应用现代科学技术的巨大飞跃。前述表5、表6所列含量测定增加的品种，也反映出内在质量控制的加强。



2.2.4标准物质建立的进展药品标准物质是用以确定产品或材料的量值，评价测量方法的准确和标定测量仪器测试质量的实物标准。我国的药品标准物质是指中国药典、部颁标准收载的法定药品品种，在药品检定时为求得鉴别、含量测定、杂质和相关物质检查等项的准确一致，用以与被测样品对比，判定其质量的实物标准，除化学对照品，由于中药鉴别的特殊需要，并设有对照药材。

随着现代科学技术发展，在药品分析领域中，特别是波谱色谱技术的广泛应用，标准物质（化学对照品）的建立迫切性明显提高，其品种数量及应用范围均在不断增加和扩大。常常是一个化学对照品的出现，即带动一批含此种成分药品检验方法及质量标准的建立，对中药标准化起着极大的促进作用。中国药典1985年版一部开始收载用于中药材及其制剂的化学对照品60种；对照药材16种。1990年版化学对照品已增加到100种；药材对照品增加至39种。1995年版，前者增至143种，后者增至94种，而2000年版药典则分别增加到203种及152种，新的化学对照品如牛蒡甙、蒙花甙、木香烃内酯、吴茱萸碱等为首次收载，这些对照品的问世，为相应含此成分的中成药含量测定方法的建立打下物质基础，对中药标准化起着极大作用。

我国在标准物质的研制品种之全、数量之多，在世界上也是名列前茅的。

随着检测方法专属性与灵敏度增加，化学对照品质量上有所提高，如1990年版药典收载黄芩，黄连均以E值计算含量，当时只有薄层鉴别用定性对照品，95年版分别改为高效液相色谱法及薄层荧光扫描法，对照品纯度提高含量均在98%以上；有的对照品，由天然药物提取极不稳定进而改为化学合成，从而纯度及稳定性更有所保证，如血竭素高氯酸盐。又如儿茶主含儿茶鞣酸20～50%，并含α儿茶素及表儿茶素。以往药典规定总鞣质含量以控制儿茶的质量，2000年版药典采用高效液相色谱法测定儿茶中儿茶素和表儿茶素的总量，不仅为儿茶的质量控制提供了新的方法和指标，而且尚可用于鉴别茜草科方儿茶（方儿茶不含表儿茶素），且更具专属性。



2.2.5其他目前对中药中农药残留量的检查，引起国内外的重视，研究工作已广泛开展，但药典一直未收载，2000年版药典新增有机氯类农药残留测定法，首次规定甘草、黄芪，含有机氯农药残留量六六六（总BHC）不得过百万分之零点二；滴滴涕（总DDT）不得过百万分之零点二；五氯硝基苯（PCNB）不得过百万分之零点一的法定标准。



3检验方法研究的动向检验方法的建立是中药质量控制的前提而含量测定是提供量化数据，使其科学性加强。一个药品标准所规定的检验方法是否准确，直接关系到药品质量的判定。前述国家药品标准收载的检验方法及检测仪器设备等既要适合当前的国情，又要便于全国推广应用，因此仍然有很大比例采用经典的分析方法，包括重量法、容量法、分光光度法等。随着现代科学技术发展，近年几版药典虽不断增收和修订，引入了较多的色谱分析方法，但控制药品质量还有很多难题尚需采用高新技术，经我国药学工作者不断努力，使许多新方法、新技术广泛应用于中药研究与检测中。



3.1色谱法这里是指在一般的气相、高效液相、薄层扫描色谱法的基础上，对所采用的色谱柱或检测器又有新的进展，增加了特有的功能。



3.1.1气相色谱法中采用毛细管色谱柱已广泛用于挥发性成分的研究，它虽然不如填充柱分析时间短、费用低、操作过程简单易于掌握。但由于挥发油类成分组成复杂，毛细管柱分离度高，与质谱结合其成分可准确予以鉴定，如紫苏与白苏不同的化学型的挥发油成分的研究，其优点是填充柱性能所不及的。李永庆等对戒毒药（康灵片）中微量东莨菪碱检测成功，不仅灵敏度高，而且结果准确可靠［1］。采用空心石英毛细管柱对月见草种子油经甲酯化，采用程序升温对所含脂肪酸进行测定，解决了一般气相法不易使γ－亚麻酸色谱峰与相邻峰亚油酸（含量约占73.5%）达到基线分离的困难，并用十七烷酸甲酯为内标与组分峰完全分开，且与待测组分相邻，保证了γ－亚麻酸含量测定的准确性与精密度，并排除和避免了分析过程中干扰因素和影响，减少了误差［2］。

直接蒸发－气相色谱法，样品不需前处理，可直接进行分析，即将分析样品放在与色谱仪连

接的器皿中，在适当温度下，使样品挥发性组分在很短时间内蒸发出来，被载气带入色谱柱

内进行分离及检测，如中成药中冰片和麝香的测定［3］。

裂解气相色谱是将微量样品称于小铂船中，直接放进与气相色谱相连的裂解器中，经加温使

样品裂解为碎片，国内80年代即已用于苏合香胶、花椒等分析［4］。

应用气相色谱/富里叶变换红外（GC/FTIB）联用法测定中药，可以鉴定未知物，将实验谱图与标准谱图库中气相、红外谱图逐一核对或进行谱图解析，可获得特征官能团和色谱图数据信息［5-6］。



3.1.2高效液相色谱法色谱条件的选择  主要是色谱柱与流动相适当。中药分析中应用最多的是十八烷基键合相C18、C8等反相ODS柱；极少数采用正相柱，如分离同系物或同分异构体化合物；离子交换柱用于分离水溶性离子化合物；有些化合物应选用氨基柱［7］。高效液相色谱法，除药典收载的一些品种采用外，在中药分析中适用范围很广，对生物碱、甙类、黄酮、有机酸、酚类、木脂素类等均可采用。如速效救心丸、川归滴丸及复方川芎注射液中川芎嗪的测定［8］。克泻灵片中苦豆子所含苦参碱，槐定碱、槐果碱、槐胺碱及氧化苦参碱等5种生物碱进行测定［9］。鱼腥草及其制剂感冒宁滴剂中槲皮甙的测定［10］。银杏叶制剂中黄酮甙的测定［11］。小柴胡汤颗粒剂中柴胡皂甙［12］，凉解感冒合剂中牛蒡甙的测定［13］。心脉安颗粒剂中甘草酸的测定［14］以及北细辛非挥发性成分芝麻脂素和细辛脂素的含量测定［15］等。以上各种成分测定均采用紫外检测器，而采用二极管阵列检测器，对欲检测的色谱峰纯度进行评估，使测定结果的科学性与准确性更加提高。如消痤颗粒剂中绿原酸的测定［16］及人参单体皂甙的研究［17］以及龙胆泻肝丸中龙胆苦苷的测定［18］等都取得满意的实验结果。

对有些化合物只具有末端吸收，如各种人参皂甙、黄芪甲甙更适合采用蒸发光散射检测器。汤俊等应用该法成功地测定了西洋参中具特征成分拟人参皂甙F11(Pseudoginsenoside F11)以区别同属植物人参［19］，该种检测器对只有紫外末端吸收的非挥发性成分分析，是一种理想的检测器。

高效液相—质谱联用，较之气—质联用应用前景更为广阔，欲鉴定的化合物不受其是否具挥发性的限制，通过液相色谱的分离即可以发挥质谱鉴定所获取的参数。采用LC/MS/MS联用仪（PE－SCIEX API365型）对成分复杂的中药更可以直接分离，且不需要提纯，根据质谱参数可以确定出结构，薛燕等首次从泻心汤沉淀物（大黄、黄连、黄芩）中鉴定其含有黄连中的四种生物碱（小檗碱、巴马丁碱、黄连碱和药根碱），操作简便、快速［20］。对人参类药材进行分析也取得满意的结果［21］。



3.1.3薄层扫描法药典收载数十种药材与成药采用薄层扫描法测定含量，虽然它的测定结果重现性不及高效液相色谱法，影响测定结果的因素较多，如薄层板的质量，展开湿度、温度、点样与显色技术及显色灵敏度等，但对中药特别是大复方中药制剂或无紫外吸收的成分，担心用高效液相色谱污染色谱柱问题，还是有一定的使用价值。这里补充综述几篇成药处方量大或一些新的成分，药典未收载的或薄层色谱质量高的文献报道。

如经过特殊加工的大复方龟龄集中测定人参皂甙Rg1，摸索了去除脂溶性、水溶性杂质使欲测成分不损失，而又解决了背景干扰，斑点分离不好和拖尾现象［22］。薄层荧光扫描法测定万应锭胶囊中小檗碱，摸索提取溶剂及方法，克服儿茶中鞣质的干扰，色谱检测条件具灵敏度高［23］。又如刺五加口服液中异秦皮啶的测定［24］ 。大马勃、白马勃、脱皮马勃、粒形灰包、梨形灰包及灰包菇等6种马勃中麦角甾－7，22－二烯－3－酮的含量测定［25］，为中药马勃的开发利用提供依据。

颜玉贞等对银杏叶提取物及制剂中萜类内酯薄层色谱荧光扫描定量测定进行了研究，建立了采用优化条件展开的薄层色谱进行热化学衍生荧光，原位薄层定量，同板同时测定银杏内酯A、B、C及白果内酯，最低检出限分别为0.12～0.35μg，灵敏度分别为0.25～0.5μg，较HPLC示差折光检测器提高10倍，分析时效比提高6倍以上［26］。尚有薄层－紫外法测定八种红景天属植物中红景天甙［27］及以薄层－化学发光淬灭法测定中成药中大黄素和大黄酚含量的研究［28］。



3.2DNA分子遗传标记技术90年代以来，由于PCR（Polymorase Chain Reaction）技术的发展，DNA指纹技术不仅限于采用杂交的方法，且有许多新的策略相应产生，最为重要的是DNA多态性可通过PCR快速而灵敏地检测到，于是在短短的几年中，基于PCR的RFLP、RAPD、SSR、AFLP等等层出不穷。如今这些在PCR基础上发展起来的检测DNA多态性的分子标记技术也称为DNA指纹。DNA分子作为遗传信息的直接载体，不受外界因素和生物体发育阶段及器官组织差异的影响，每一个体的任一体细胞均含有相同的遗传信息。因此以分子遗传标记进行物种鉴别更为准确可靠。

DNA分子遗传标记技术已被应用在药材鉴定方面，通常PCR扩增的模板DNA都来自新鲜的动植物组织材料。而鉴定药材，由标本中提得药材本身的DNA，并能用于PCR扩增已有成功的报道［29］。曹晖等用DNA随机扩增技术(简称RAPD)成功地鉴别了中药材地胆草与白花地胆草混淆品，区别特征明显［30］。黄丰等报道了采用随机引物对西红花及其混淆品和伪品川红花、莲须、玉米须、黄花菜等进行扩增，根据DNA指纹图谱的差异进行鉴别［31］。在动物药材中，特别是以部分组织器官入药和切成块的药材，由于外部形态特征已被破坏，组织学特征又不明显，理化成分复杂，专属性与重现性差，较难准确鉴定。王义权等用DNA分子遗传标记技术对蛇类药材鉴定研究，用RAPD方法成功地鉴定了乌梢蛇及其混淆品，和金钱白花蛇及其伪品［32］。王建云等从鹿鞭中提取微量DNA并进行序列鉴定，试验结果表明牛鞭、驴鞭与梅花鹿鞭有明显的差异［33］，这些结果预示着目前只凭传统经验鉴别的动物药，特别是鞭类药材如海狗肾等，采用DNA分子遗传标记技术，有望作出准确的鉴定。

目前中药工艺与鉴定研究中，常提出标准汤剂，标准指纹图谱等，但首先要保证药材原料应为正品优质道地药材，才能制备出用以作为标记的对照物，但道地药材与非道地药材植物品种相同，在形态和药材性状等方面差别不十分明显很难鉴定，且道地药材的产生除了与药材特定的生境、地质土壤和特殊的采收加工技术等多种因素有关外，还与其产区内这一物种的地方种群或居群中遗传上的特殊性有关，使其呈现地域性优势，如种群密度大，生物产量高，有效成分含量高，药材质量好等。由于这种遗传性的差异，使道地与非道地药材二者产生差异［34］，但采用DNA分子遗传标记鉴别方法，再辅以其他技术能够解决这一难题。

吴谦等报道了对复方制剂海王金牡蛎制剂的鉴别与含量测定，以蛋白质分子作为抗血清采用免疫测定法取得成功［35］，如欲检测复方制剂中某种药味是否存在，必须对这种药材的分子遗传标记研究，找到该种高度特异性的DNA片段，便可以此为基础，制备出对该种高度特异的寡核苷酸探针，经分子杂交进行DNA指纹分析，从而达到鉴别目的，但难度较大。



3.3高效毛细管电泳高效毛细管电泳是近年迅速发展起来的一种重要分离技术，具有色谱和电泳两种分离机理，依据样品中各组分之间淌度，和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术，HPCE有多种分析模式，毛细管区带电泳、毛细管胶束电动色谱（MECC）、毛细管等速电泳（CITP）、毛细管等电聚焦电泳（CIEF）、毛细管凝胶电泳（CGE）等分别适用于各种不同性质物质的分离。具有高效、低耗、用样少、应用范围广的优点，发展极快，已在多肽、蛋白质、核酸、手性化合物等生物活性物质分离方面显示了极为广阔的前景［36］。动物类药材由于成分复杂，特别是经贮存一定时间后，其蛋白质变性较严重，普通电泳鉴定较困难，本方法具速度快、分辨力强、重现性好等特点，张朝辉等首次对12种海马、海龙类药材采用PHCE进行鉴别研究，结果表明种间区别较明显［37］。林梅等选择区带毛细管电泳分离模式，以麻黄碱为内标，建立了适合莨菪类生物碱阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、樟柳碱优化分离与颠茄酊剂定量分析的高效毛细管电泳方法，可推广应用于含莨菪类生物碱中药制剂的质量控制［38］。同样以盐酸伊托必利为内标，有效长度40cm的石英毛细管柱，并配备二极管阵列检测器，精确的测定了伸筋丹胶囊中士的宁和马钱子碱的含量［39］。高效毛细管电泳在中药检测有效成分的应用上，较之数年前文献报道中仅见港台作者的论文，确实有了很大进展。



3.4指纹图谱的研究前已多次述及中药成分特别是中成药成分复杂，尽管在质量标准中建立多项鉴别试验，但也不能做到逐一药味，逐一成分进行鉴定。为了使药物检出尽可能多的覆盖全貌，研究药物的指纹图谱已经提到议事日程。美国FDA认为指纹图谱各种指标，目前尚不要求均能鉴定出为何种化学成分，但必须批批药品指纹图谱一致，也就意味着药品质量稳定，对一个企业固定的产品要求，应该说是可行的。一个成功的指纹图谱，应具有特征明显，专属性强，重现性好的特点，而且要方便操作与应用。



3.4.1样品无论药材或成药，首先要建立标准图谱，选用经品种鉴定的正品优质地道药材，确定图谱的特征参数。另收集多产地，具充分代表性，符合药用规格的样品，对图谱特征的重现性进行考查。随之收集一些易混淆或曾出现的伪品，以所确定的特征若能加以区别和辨认，则更为理想。

实验样品的制备可根据药材所含成分选定，尽可能考虑对不同成分的兼容性，通常用不同极性的溶剂2～3种，制成供试品，供一组图谱综合鉴定应用。也有用药材粉末直接测定的，由于取样甚微，要注意取样代表性与均匀性。

成药指纹图谱的研制，除原料应保证品种正确和质量稳定外，还必须处方组成和用量固定、生产工艺稳定。

制备图谱时实验操作技术标准化、规范化，也是不可忽视的问题。



3.4.2实验方法现代光谱，色谱技术已广泛应用，在企业中对产品进行日常监测，则应选用仪器设备易得，且便于操作的方法，如红外光谱信息量大，紫外光谱也可应用，但特征信息远不如前者。色谱方法无论在法定标准中还是研究工作中均已作为通用的检测手段，仪器设备也较为普及，气相色谱多用在含挥发性物质的药物中，薄层色谱用于大复方成药，但其重现性均不及高效液相色谱法，简便而快速。也有用毛细管电泳法，由于灵敏度高，检测精度高，全图谱的重现性较难做到，其它如X光衍射……等指纹谱均有研究。



3.4.3图谱的应用从目前发表的文献中，大多采用直观对比，即待测样品与标准图谱的特征比较，也有进行深入的研究，引入相对指数、重叠率、八强峰等量化数据，较直观可比性更为科学、准确。对成药来讲，无论直观对比或以量化数据相比均只能发现问题，尚不能解决存在问题由何引起，因此还要做归属试验，即根据成药处方各药味做阴、阳对照制作图谱，对特征进行分析，在鉴定运用中方可准确找出症结所在。如果能确证是何种化学成分，则可进一步做定量检测。

田进国等用红外光谱鉴别研究中药材，提供了大量图谱与数据［40］，并选用30种供药典方法用的对照药材进行了红外光谱测定［41］，近年又报道了对甘草［42］及苍耳子与东北苍耳子的鉴别［43］。陈黎等用同样方法对何首乌与其混淆品毛脉蓼、翼蓼、耳叶牛皮消、头花千金藤、芭蕉等进行鉴别［44］。曾明等应用于葛根及同属植物根进行鉴定，粉葛与野葛特征相近而同属植物则相差较大［45］。矿物药禹余粮（褐铁矿结核和褐铁矿）二者在主成分碱式氧化铁［FeO(OH)］和光学性质相似，但红外光谱有很大区别［46］。

采用紫外光谱法也是手段之一，陈永林等采用一阶、二阶导数光谱法对独活等6种伞形科药材独活、羌活、川芎、藁本、柴胡和大叶柴胡进行了鉴别［47］。

苏薇薇等对中成药乌鸡白凤丸石油醚提取物进行了气相色谱分析，获得指纹特征，以十七烷作内标，19批样品对应峰的保留值一致，从色谱峰面积比，反映了样品化学组成及含量分布状况，可作为乌鸡白凤丸质量评价的量化指标［48］。

以液相色谱相对保留值指纹谱鉴定大黄，对3种正品大黄的9个样品进行色谱分析，归纳其指纹特征，以相对保留值及相对峰面积量化数据，引入重叠率、八强峰及大黄主要化学成分及含量为指标，评价了10种待测样品的真伪优劣，较直观对比法准确性明显提高［49］。

薄层色谱法也是可以给出信息量大的方法之一，但对其色谱的质量应进行精心的研究，用经过优化的溶剂系统在双槽展开箱中，用硅胶薄层板作两次展开，对黄连所含原小檗碱型生物碱进行薄层色谱分离，所获商品黄连薄层色谱中可检出六种生物碱，使Rf值较低的药根碱与非洲防己碱互相分离，在黄连样品中可观察到包括微量生物碱在内的9～11个斑点，不同品种黄连生物碱的种类及含量均有明显差别［50］。

X光衍射图谱是20世纪70年代后迅速崛起的新型结构分析方法，单晶X射线衍射分析法为中药有效成分的结构测定和开发研究作出了巨大贡献。而粉末X衍射分析法在中药分析领域中的运用是X衍射技术应用范围的又一突破。该法具快速、简单、图谱指纹专属性强，信息量大，所需样品量小等诸多优点，在蓬勃发展的中药分析领域中，必将具有广阔的应用前景。

王钢力等对X射线衍射分析法在中药分析的应用做了综述报道［51］。郑笑为等应用粉末X衍射Fourier谱分析建立海水珍珠、淡水珍珠、珍珠粉与珍珠层粉各类珍珠的X衍射特征标记峰，对其进行鉴定，并总结出珍珠的质量评价问题［52］。



3.5其它应用到中药鉴定的手段还有多方面进展，如显微定量，以黄连石细胞进行计数测定香连丸中黄连的含量与药典法测定黄连总碱成正相关［53］。对一些成分尚不清楚而组织细胞有特征的药味，应用显微定量更有价值。

超临界流体萃取的显著特点之一，是可以在较低温度下进行萃取分离，特别适合于分离热稳定性差的成分。大蒜制剂，避免加热影响，其抑菌作用可提高3～6倍，应用超临界CO2萃取大蒜有效成分，乙烯基烯丙基硫化物和乙烯基烯丙基二硫化物系首次从大蒜中分离到，即可以得到用水蒸气蒸馏得不到的成分。

该法与HPLC联用测定何首乌中大黄酸、大黄素及大黄素甲醚［54］，黄花蒿中青蒿素的含量［55］获得成功。

胶类中药材鉴定是非常棘手的问题，翟乙娟等探讨了用圆二色谱法将阿胶、鹿角胶、龟甲胶及其伪劣品区别开，并建立了标准图谱及数据，方法简便易行［56］。用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳除应用于以上几种胶的鉴别外，还用于杂皮胶、龟板胶、鳖甲胶、海龙胶及鱼鳞胶进行比较可予以区别［57］。

分光光度法在化学各领域中的应用已有一百多年的历史，由于仪器简单，操作简便，准确度高，是药物分析中不可缺少的手段，常用于中药材的质量评价，但在复方制剂的测定中常有干扰，充分发挥分光光度仪多功能作用，将化学、计量学与数学或统计学结合，在不经分离的情况下即可解决化学物质的测定。如用双波长法测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩甙的含量［58］；三波长分光光度法测定连蒲双清片中盐酸小檗碱的含量［59］；多波长紫外可见光谱测定左金丸、戊己丸中黄连小檗碱的含量［60］。应用一阶导数光谱法测定由十味药组成的滋肾胶囊中丹皮酚的含量［61］及感冒退热冲剂中靛玉红的含量［62］；二阶导数分光光度法测定玉阳欣液中淫羊藿甙的含量［63］，还有比色等导数值导数光谱法、正交函数光谱法、系数倍率法、差示分光光度法等等。

尚无色谱仪的基层单位，可充分利用分光光度法对中药进行内在质量评价。但复方中药制剂由于成分多，杂质相对比较复杂，且多为天然产物，受产地、采收季节及贮藏条件等多因素影响，消除杂质的试验条件与计算数值不似化学药品恒定，计算分光光度法的重现性难于保证，故一般不收于法定标准中，只做内控应用。

用生化指标评价中药质量与药效相关性更为密切，以淀粉酶活力比较测定鸡内金、鸽内金、鹌鹑内金的比活力［64］，提出了量化数据。

用生物检定法评价中药质量，较化学测定更能反映其生物活性，对整体的药效和毒性作有效的控制，生物测定法要求首先要有量效关系，造模简便，时间短，操作容易，周重阳等利用大蒜提取物中大蒜辣素和大蒜新素具有抗菌作用这一特点，用生物检定方法进行检测，结果与气相色谱法测定结果一致［65］。

对一些毒性中药，基础研究工作薄弱，化学成分尚未阐明，或在复方中难于检出者，有采用“异常毒性”试验方法，用一组小鼠来检测其毒性。实验可依据药物的毒性大小，用一次给药或累计多次给药法，观察动物中毒症状及伤亡情况，制定限度，判断药物的毒性。

纵观20世纪，特别是1949年以来，中药质量标准从无到有，从宏观至微观，尤以近十年发展为快，波谱、色谱技术的应用，大大推动了中药标准化进程，随着科学技术的迅猛发展，检测手段科学性、准确性与灵敏度不断提高，以及仪器设备的普及，将使先进的检测方法更多的应用于法定标准中，中药的检定研究趋势也将是多学科渗透，从单指标至综合多指标发展，对药物的质量做整体评价，更好地保证用药安全与有效。

致谢：在本文撰写过程中得到江苏省中医药研究院鞠建明、北京市药品检验所杜勇、刘颖、金红宇、盘一嗨等同志的大力协助。



参考文献：［1］李永庆，毛细管气相色谱法测定戒毒药（康灵片）中微量东莨菪碱的含量［J］.药物分析杂志，1999，19（4）：239～240.

［2］路萍，等.毛细管气相色谱内标法测定月见草种子油中γ-亚麻酸的含量［J］.中草药，1999,28（11）：658～660.

［3］李兆林，等.直接蒸发－气相色谱法微量分析中成药的挥发性成分－中成药中冰片和麝香酮含量的测定，药物分析杂志1988，8（1）：6～8.

［4］赵兴红，等.十种花椒裂解气相色谱分析鉴定［J］.中国中药杂志，1990，15（12）：5～7.

［5］吴桥，等.气相色谱/富里叶变换红外联用测定救心油中樟脑和薄荷脑含量［J］.中国药科大学学报，1989，20(1）：13～17.

［6］吴桥，等.用Nicolet 5sxc富里叶变换红外光谱仪对中成药作GC/FTIR分析研究I，红灵散的分析［J］.分析化学，1989，17（3）：231～235.

［7］赵淑杰.HPLC在中成药分析研究中的应用［J］.中成药，1994，16（9）：45～46.

［8］赵志春，等.中药制剂川芎嗪含量的高效液相色谱法测定［J］.中国中药杂志，1991，16（12）：729～730.

［9］宋莉，等.克泻片中苦参碱类生物碱的HPLC分析［J］.中国现代应用药学杂志，1998，15（6）：38～40.

［10］苏流坤，等.反相HPLC法测定鱼腥草及其制剂中槲皮甙的含量［J］.中药新药与临床药理，1999，10（4）：232～234.

［11］俞曼雷，等.高效液相法测定银杏叶制剂中黄酮甙含量［J］.中药新药与临床药理，1998，9（1）：46～48.

［12］项进，等.小柴胡汤颗粒剂中柴胡皂甙的高效液相色谱分析［J］.中国现代应用药学，1998，15（1）：38～40.

［13］赵岚，等.HPLC法测定凉鲜感冒合剂中牛蒡子苷的含量［J］.现代应用药学，1997，14（1）：47～48.

［14］洪馨，等.心脉安颗粒剂质量标准研究［J］.中药新药与临床药理，1999，10（4）：228～231.

［15］王桂芳，等.北细辛中非挥发性成分芝麻脂素和细辛脂素的含量测定［J］.药物分析杂志，1999，19（4）：251～253.

［16］吕源珊，等.消痤颗粒剂中绿原酸的HPLC法含量测定及二级管矩阵检测（PDA）对其纯度评估［J］.中草药，1998，20（2）：97～98.

［17］刘军，等.HPLC－光敏二极管阵列检测法测定人参单体皂甙的研究［J］.中草药，1998，29（4）：228～230.

［18］许军，等.HPLC光电二极管矩阵检测器测定龙胆泻肝丸中龙胆苦甙的含量［J］.中草药，1999，30（5）：348～349.

［19］汤俊，等.应用HPLC/ELSD法测定西洋参中拟人参皂苷F11的含量［J］.药物分析杂志，1999，19（4）：241～243.

［20］薛燕，等.用LC/MS/MS和RP-HPLC法对泻心汤煎煮产生的沉淀物的研究［J］.药物分析杂志，1999，19（3）：224～227.

［21］Xiaomin Wang at al.Determination of Ginsenosides in Plant Extracts from Panax ginseng and Panax quinquefolius L. By LC/MS/MS.Anal.Chem.1999,71(8):1579～1584.

［22］张中苏，等.薄层扫描法测定龟龄集中人参皂苷Rg1的含量［J］.药物分析杂志，1999，19（1）：13～15.

［23］伍丕娥.薄层荧光扫描法测定万应锭胶囊中小檗碱的含量［J］.药物分析杂志，1998，18（4）：243～244.

［24］赵春香，等.刺五加口服液中异秦皮啶的含量测定［J］.中国现代应用药学，1998，15（1）：41～42.

［25］王隶书，等.薄层扫描法测定不同品种马勃中麦角甾－7，22－二烯－3－酮含量［J］.中草药，1997，28（1）：15～16.

［26］颜玉贞，等.银杏叶提取物及制剂萜类内酯薄层色谱荧光扫描定量测定研究［J］.中国中药杂志，1997，22（3）：159～162.

［27］安丰，等.薄层－紫外法测定八种红景天属植物中红景天甙的含量［J］.中国中药杂志，1998，23（1）：43～44.

［28］伍莉萍，等.TLC－化学发光淬灭法测定中成药中大黄素和大黄酚含量的研究［J］.中成药，1998，20（1）：18～20.

［29］王亚明，等.中药材龟板和鳖甲中DNA的提取与扩增［J］.药学学报，1996，31（6）：472～475.

［30］曹晖，等.DNA分析技术在中药质量研究中的应用［J］.中药新药与临床药理，1997，8（2）：112～115.

［31］黄丰，等.西红花的RAPD鉴别研究［J］.中药新药与临床药理，1999，10（4）：226～228.

［32］王义权，等.DNA分子遗传标记鉴别在生药鉴定中的应用前景［J］.中国中药杂志，1997，22（10）：583～586.

［33］王建云，等.鹿鞭的微量DNA提取序列鉴定［J］.中国中药杂志，1997，22（10）579～583.

［34］王康正，等.DNA分子诊断技术在药用植物研究上的应用［J］.中国中药杂志，1997，22（12）709～720.

［35］吴谦，等.酶免疫技术在牡蛎制剂质量研究中的应用［J］.中药新药与临床药理，1997，8（3）：159～161.

［36］赖小平，等.高效毛细管电泳及其在中药质量分析的应用［J］.中药新药与临床药理，1998，9（3）：186～187.

［37］张朝晖，等.12种海马、海龙类药材高效毛细管电泳法鉴别［J］.中国中药杂志，1998，23（5）：259～260.

［38］林梅，等.高效毛细管电泳分离测定颠茄制剂中莨菪类生物碱［J］.中草药，1998，29（8）：518～520.

［39］姜舜尧，等.毛细管区带电泳测定伸筋丹胶囊中士的宁和马钱子碱的含量［J］.中草药，1999，30（5）：341～342.

［40］田进国，等.红外光谱法鉴别中药材的初步探讨［J］.中草药，1989，20（5）：29～32.

［41］田进国，等.五十种药材对照品红外光谱的研究［J］.中国药科大学学报，1996，27（1）：24～28.

［42］田进国，等.四种甘草的红外光谱鉴别［J］.中药材，1997，20（4）：175～176.

［43］田进国，等.苍耳子与东北苍耳子的红外光谱鉴别［J］.中药材，1997，20（8）：393～394.

［44］陈黎，等，何首乌及其混伪品的红外光谱鉴别［J］.中药材，1998，21（4）：182～183.

［45］曾明，等.葛根及同属植物根的红外光谱鉴定［J］.中药材，1998，21（8）：392～394.

［46］李峰，等.矿物药禹余粮的比较鉴别［J］.中国中药杂志，1998，23（5）：261～262.

［47］陈永林，等.独活等6种伞形科药材导数光谱鉴别［J］.中药材，1999，22（3）：123～124.

［48］苏薇薇，等.乌鸡白凤丸气相色谱指纹特征研究［J］.中药材，1998，21（1）：37～38.

［49］洪筱坤，等.HPLC－相对保留值指纹谱鉴别大黄［J］.中国中药杂志，1993，18（11）：650～652.

［50］颜玉贞，等.黄连薄层指纹图谱研究［J］.中国中药杂志，1993，18（6）：329～331.

［51］王钢力，等.X射线衍射分析法在中药分析中的应用［J］.中国中药杂志，1999，24（7）：387～389.

［52］郑笑为，等.中药材珍珠的X衍射Fourier谱研究［J］.药物分析杂志，1999，19（4）：246～250.

［53］梁益敏，等.香连丸中黄连的显微定量测定［J］.中国中药杂志，1997，22（5）：285～286.

［54］袁海龙，等.超临界流体萃取－HPLC法测定何首乌中大黄酸、大黄素及大黄素甲醚的含量［J］.中草药，1999，30（4）：258～260.

［55］黄晓芬，等.黄花蒿超临界CO2提取物中青蒿素含量的RP－HPLC测定［J］.中药材，1998，21（6）：303～304.

［56］翟乙娟，等.阿胶、鹿角胶、龟甲胶圆二色谱鉴别［J］.中药材，1998，21（2）：66～67.

［57］李峰，等.七种动物胶类药材SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别［J］.中药材，1999，22（4），184～185.

［58］张永恒，等.双黄连口服液4种提制工艺制品的质量考察［J］.中成药，1991，13（10）：2～3.

［59］岳淑梅.三波长分光光度法测定连蒲双清片中盐酸小檗碱的含量［J］.中成药，1999，21（2）：71～72.

［60］黄莺，等.多波长紫外可见吸收光谱法用于中成药含量测定［J］.中成药，1998，20（4）：9～12.

［61］张林松，等.滋肾胶囊质量标准的研究［J］.中国现代应用药学杂志，1999，16（3）：44～47.

［62］张娇燕，等.一阶导数光谱测定感冒退热冲剂中靛玉红的含量［J］.中成药，1999，21（6）：293～294.

［63］胡增仁.二阶导数分光光度法测定玉阳欣液中淫羊藿甙的含量［J］.中成药，1997，19（10）：17～18.

［64］潘金火.鸡内金、鸽内金、鹌鹑内金淀粉酶活力比较［J］.中草药，1997，28（5）：280～281.

［65］周重阳，等.用生物测定法测定大蒜油中大蒜辣素和大蒜新素的含量［J］.中草药，1997，28（1）：18～20.